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在線咨詢:間接ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果為何不顯色?

更新時(shí)間:2016-12-29 點(diǎn)擊量:1777

    昨天下午,我公司收到一位客戶對(duì)實(shí)驗(yàn)的咨詢留言。這位客戶說道:“初次做間接ELISA,做了幾次結(jié)果都沒有顯色,原因在哪里呢”
   

    收到留言后,吳為客戶安排技術(shù)去。針對(duì)問題描述,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員分析出為何間接ELISA沒有顯色,可能原因有這幾個(gè)方面:

1.包被原:包括你的包被液有無問題,有沒有配錯(cuò)。包被原一般加100微升,37度2小時(shí);

2.封閉:封閉液用的是否適合?你說做了幾次都沒顯色,空白孔也不顯嗎?如果空白也無顏色,那封閉就沒有問題。一般封閉是200微升每孔,也可以滿孔封閉

3.一抗:檢查你的一抗是否失效。是否是在37度反應(yīng)

4.二抗:底物,底物緩沖液……這些都要好好檢查!

5.洗滌:用PBST洗滌,包被和封閉時(shí)洗板3次;一抗二抗洗滌5次,每次間隔3分鐘。
                     

    手工和機(jī)器洗滌沒什么不同,就是省力一些。洗5次不會(huì)有負(fù)影響,在一抗和二抗洗滌過程中,恰恰需要多洗幾次,這樣有助于減少非特異性吸附。

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