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如何做好ELISA實驗?

更新時間:2021-01-29 點擊量:1166
在生產過程中,不同批次的試劑的質量,保證*一致非常困難,ELISA試劑盒甚至通過批檢驗項目和結果也不同,因此必須選擇和訂購試劑長批次,并確保小鼠ELISA試劑盒保存條件。嚴格執(zhí)行本標準可以避免因試劑批號變化與質量控制系統(tǒng)和復雜的過程,重新評價試劑重新建立,并能保證結果的穩(wěn)定性;有效期短,使用率低的試劑,應小包裝,包裝,可每次都是采取,以避免重復凍融破壞試劑引起的。
 
在Elisa試劑盒的使用過程中常見問題有很多如, 加樣器不確;尤其10ul以下的加樣器,對結果影響很大;  保溫設備不良;  洗滌用水不規(guī)范。
如何解決這些問題呢:
1在使用過程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進口產品(芬蘭、法國等);
2 仔細校正溫度到37℃,水浴箱為佳;  
3 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等; 
4 認真閱讀使用說明書。  
 
樣品加樣:  
1 加樣不準確;  2 沒有混勻。  加樣時一定要仔細。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。  
2 加樣后,反復抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導致非特異性吸附。  洗滌  洗滌不*  ①每次注水洗滌,應靜止30秒鐘;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內水分; 
3 可選用塑料洗滌瓶。  加酶反應 漏加 滴加后,認真檢查各孔  結果判斷  ①包括陰性對照孔在內,各孔顯色普遍偏深;②包括陽性對照在內,各孔均無顯色;③陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常; 
4 有些標本顯色不深,判斷陽性困難。  ①可能是洗滌不充分;加樣過量;溫育時間過長溫度過高;按說明書重新操作。如無改善, 可與生產廠家聯(lián)系;②可能是漏加樣本或酶液;溫育時間過短溫度過低;試劑保存不當活性下降;按說明書重新 操作。如無改善,可與生產廠家聯(lián)系;③陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善,可與廠家聯(lián)系,索要對照品; ④重新操作。使用酶標儀,測定光吸收度,按P/N值標準判斷。  ELISA試劑盒保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。  對照品 對照品為凍干品 按對照管標示,加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶,充分溶解混勻??砂凑f明書使用。
 
   上海恒遠生物是一家專業(yè)代理Elisa試劑盒、生物試劑、血清、抗體、標準品對照品、培養(yǎng)基、細胞公司,主要銷售Elisa試劑盒和生物試劑,上海恒遠公司服務理念:“一切以誠信為本,一切以用戶價值為依歸!為顧客提供全面售前、售中、售后服務”。